Эффективность 3С – подобного ингибитора протеазы в лечении различных форм приобретенного инфекционного перитонита кошек

  September 13, 2017

Перевод с англ.: ветеринар - невролог/кардиолог Васильев

Безопасность и эффективность 3С – подобного ингибитора протеазы GC376 была протестирована в когортном исследовании кошек, имевших владельцев с различными формами инфекционного перитонита кошек (FIP).

 

Двадцать кошек имевших возраст 3,3 -82 месяца (в среднем 10,4 месяца), были использованы в полевом исследовании. Четырнадцать кошек имели влажную или сухую и влажную формы FIP и шесть кошек имели сухую форму FIP. GC376 назначался подкожно каждые 12 часов в дозе 15 мг/кг. Кошки с неврологическими симптомами были исключены из исследования.

 

 У девятнадцати из 20 кошек с проведенным лечением GC376   нормализовалось состояние в течение 2 недель после начала лечения. Однако, симптомы заболевания рецидивировали через 1-7 недель после первичного лечения и случаи рецидивов и   новых случаев в конечном итоге требовали лечения в течение, как минимум, 12 недель.Рецидивы, больше не отвечающие не лечение, наблюдались у 13 из этих 19 кошек в течение 1-7 недель после начала первичного или повторного (повторных) курса лечения Тяжелое неврологическое заболевание наблюдалось у 8/13 кошек ,которые не отвечали на лечение, и 5 кошек имели рецидивирующие абдоминальные поражения.

 

На время написания статьи семь кошек были в состоянии ремиссии. Пять котят в возрасте 3,3 -4,4 месяца с влажным FIP лечились в течение 12 недель и находились в состоянии ремиссии после окончания лечения и ко времени написания статьи в течение 5-14 месяцев (в среднем 11,2 месяцев). Шестой котенок был в состоянии ремиссии в течении 10 недель после 12 недель лечения, затем у него развился рецидив и он ответил на второй курс лечения GC376. Седьмой была 6,8 летняя кошка только с вовлечением мезентериальных лимфоузлов, у которой появилась ремиссия после трех рецидивов, которые требовали прогрессирующе более длительных повторных курсов лечения в течение 10 месяцев лечения.

 

Побочные эффекты лечения включали преходящее ощущение жжения после иньекции и иногда очаги подкожного фиброза и потери волос. Наблюдалось замедление развития и нарушение смены зубов у кошек, леченных до достижения 16 -18 недель возраста.

 

GC376 показал обещающие результаты в лечении кошек  с определенными формами инфекционного перитонита кошек и открыл дверь  в  область терапии лекарственными препаратами, направленным непосредственно на вирус.

 

Лекарственные препараты, которые прямо ингибируют репликацию вируса, стали основным направлением в лечении хронических вирусных инфекций, таких как вирус иммунодефицита /СПИД¹ , вирус гепатита С¹ , вирус гепатита В, герпесвирус и острые инфекции, такие как грипп. РНК –вирусы, такие как вирус гепатита С, вирус иммунодефицита человека – 1, представляют собой идеальные цели для вирусной ингибиции, такой как  РНК –зависимая РНК полимераза   и протеаза. Протеазы являются особенно хорошей целью, поскольку, они вовлечены в развитие вируса (вирус иммунодефицита человека -1) или продукцию функциональных вирусных белков (вирус гепатита С)

 

Ингибиторы протеаз также используются в комбинации с ингибиторами обратной транскрипции для вируса иммунодефицита /СПИД при пожизненной терапии и комбинации различных ингибиторов протеаз высоко эффективны в лечении гепатита С у людей.². Поэтому, неудивительно, что вирусные протеазы также должны быть привлекательной целью при изучении РНК – вирусных инфекций у животных. Ким с сотрудниками синтезировал пептидил соединения, направленные на 3С –подобные протеазы, и оценил их эффективность против коронавируса кошек и калицивируса кошек, а также важных человеческих РНК –вирусов, которые кодируют 3С –подобные  протеазы.^3–6 Они идентифицировали серии соединений, которые показали сильную ингибиторную активность против различных коронавирусов, включая коронавирус кошек, с широким диапазоном безопасности. Invivo эффективность их ингибиторов 3С –подобных протеаз была оценена на мышах, инфицированных вирусом гепатита мышей А59, коронавирусе мышей и была выявлена значительна редукция титров вирусов и патологических поражений. ⁵

 

В настоящее время нет коммерчески доступных антивирусных препаратов для лечения коронавирусных инфекций у людей и животных и исследования Кима показали, что, в качестве главного доказательства, ингибиция 3С –подобных протеаз может вести к супрессии репликации коронавирусов invivo.^4,5 Они предположили, что некоторые их ингибиторы 3С –подобных протеаз могут быть использованы в качестве терапевтических агентов против этих важных вирусов у домашних и диких кошек.

 

Это было продемонстрировано в последующем исследовании с использованием экспериментально вызванного инфекционного перитонита кошек у лабораторных кошек.⁶ Хотя экспериментально вызванный инфекционный перитонит кошек высоко фатален при достижении определенной стадии, лечение GC376 в течение 14 -20 дней вызывало быструю ремиссию заболевания у 6 кошек, которая длилась более  12 месяцев ко времени написания статьи.

Диагноз инфекционного перитонита кошек был подтвержден ко времени подбора кошек в исследование на основании данных о поле, породе, возрасте, клинической истории болезни, данных первичных лабораторных тестов, физикального обследования и повторных анализов крови и исследований выпотов. Мануальной пальпации брюшной полости обычно было достаточно для идентификации асцитов, увеличенных брыжеечных лимфоузлов, увеличения слепой кишки и  ассоциированных подвздошных –слепокишечных –ободочных лимфоузлов, масс в почках и инфильтрации толстой  кишки. Мануальная пальпация дополнялась, когда это было необходимо, ультразвуковым исследованием.

 

Глаза обследовались первоначально прямой офтальмоскопией на наличие любых нарушений в сетчатке, преципитатов  в передней камере глаза или в задней части роговицы или опалесценции. Наличие офтальмологического заболевания подтверждалось, при необходимости, полным офтальмологическим обследованием, проведенным в офтальмологическом отделении Veterinary Medical Teaching Hospital (VMTH), UCDavis.

 

Наличие инфекционного перитонита кошек в дальнейшем подтверждалось обратной транскрипция-полимеразной  цепной реакцией в режиме реального времени6 , как из выпотов из брюшной или грудной полости, взятых при приеме в обследование или во время патологоанатомического исследования. Секвенирование гена протеазы вируса инфекционного перитонита кошек было проведено у кошек с рецидивами во время лечения, чтобы определить, наблюдалась ли потенциальная мутация, вызывающая лекарственную резистентность.^5,6

 

Диагноз сухой и влажной формы перитонита у трех кошек был основан на диффузном увеличении толстой кишки и поносом, слизью и кровью в кале в анамнезе, затрудненной дефекацией и калом уменьшенного размера до появления выпота в брюшной полости. Инфекционный перитонит кошек с поражением толстой кишки был описан как специфический вариант формы не выпотного инфекционного перитонита.⁹Сухой и влажный перитонит кошек также предполагался у трех кошек, вследствие замедления роста, которое предшествовало появлению выпота в брюшную полость в течение нескольких недель.

 

Изобр 1. Вид глаз у кошки до начала лечения (a) и через неделю после начала лечения (b). У этой кошки развились тяжелые неврологические симптомы через 3 недели после начала лечения.

Ингибиция  3C- подобных протеаз вируса инфекционного перитонита при помощи  GC376  была эффективна в условиях этого исследования, вызывая снижение репликации вируса и вызывая ремиссию симптомов заболевания у кошек с естественно встречающимся инфекционным перитонитом кошек, не имеющих поражения центральной нервной системы. Однако,  к  устойчивым ремиссиям в этом исследовании были склонны котята <18 недель возраста, имеющие острое начало влажной формы инфекционного перитонита кошек и кошки с сухой формой, ограниченной брыжеечными лимфоузлами, и с меньшей вероятностью наблюдалась у кошек старше 18 недель возраста, имеющих сухую, сухую и влажную формы или глазную форму заболевания.

 

Невозможность достижения стабильной ремиссии была ассоциирована с высокой частотой неврологического заболевания в течение или после прекращения лечения или рецидивированием поражений брюшной полости. Противовирусное лечение, как представляется, замедляет прогрессирование неврологического заболевания, но не обращает его вспять в дозах, использованных в этом исследовании. Причина рецидивирования  заболевания без поражения центральной нервной системы не была выявлена, но она не ассоциирована с мутацией в регионе связывания протеазы.